āĻĒā§āϰāĻžāϰāĻŽā§āĻ­āĻŋāĻ• āφāϞ⧋āϚāύāĻž:

āĻāχ āĻ…āĻ§ā§āϝāĻžāϝāĻŧāϟāĻŋ āĻ•āϞ⧇āĻœā§‡ āϤ⧇āĻŽāύ āϗ⧁āϰ⧁āĻ¤ā§āĻŦ āĻĻāĻŋāϝāĻŧ⧇ āĻĒāĻĄāĻŧāĻžāύ⧋ āĻšāϝāĻŧ āύāĻžāĨ¤ āϤāĻžāχ āĻĒā§āϰāĻļā§āύāĻ“ āϤ⧇āĻŽāύ āφāϏ⧇ āύāĻžāĨ¤ āĻĄāĻŋāĻāύāĻ-āĻāϰ āĻ…āĻ‚āĻļāϟāĻž āĻŦ⧇āĻļāĻŋ āϗ⧁āϰ⧁āĻ¤ā§āĻŦāĻĒā§‚āĻ°ā§āĻŖāĨ¤ āϤāĻŦ⧇ āĻāχ āĻ…āĻ§ā§āϝāĻžāϝāĻŧ⧇āϰ āϏāĻžāĻĨ⧇ āϰāϏāĻžāϝāĻŧāύ⧇āϰ āϏāĻŽā§āĻĒāĻ°ā§āĻ• āφāϛ⧇āĨ¤

āĻ…āĻ§ā§āϝāĻžāϝāĻŧ āϏāĻžāϰāĻŦāĻ¸ā§āϤ⧁:

ā§§. āĻŦāĻŋāĻ­āĻŋāĻ¨ā§āύ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦā§‹āĻšāĻžāχāĻĄā§āϰ⧇āĻŸā§‡āϰ āωāĻĻāĻžāĻšāϰāĻŖ:

  • āĻŽāύ⧋āĻ¸ā§āϝāĻžāĻ•āĻžāϰāĻžāχāĻĄ: ā§Š āĻĨ⧇āϕ⧇ ā§§ā§Ļ āϟāĻŋ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύ āĻ…āϪ⧁
  • āĻŸā§‡āĻŸā§āϰ⧋āϜ āϏ⧁āĻ—āĻžāϰ : āχāϰāĻŋāĻĨā§āϰ⧋āϜ
  • āĻĒ⧇āĻ¨ā§āĻŸā§‹āϜ āϏ⧁āĻ—āĻžāϰ : āϰāĻžāχāĻŦā§‹āϜ, āϰāĻžāχāĻŦ⧁āϞ⧋āϜ, āĻĄāĻŋāĻ…āĻ•ā§āϏāĻŋāϰāĻžāχāĻŦā§‹āϜ
  • āĻšā§‡āĻ•ā§āϏ⧋āϜ āϏ⧁āĻ—āĻžāϰ : āĻ—ā§āϞ⧁āϕ⧋āϜ, āĻĢā§āϰ⧁āĻ•ā§āĻŸā§‹āϜ, āĻŽā§āϝāĻžāύ⧋āϜ, āĻ—ā§āϝāĻžāϞāĻžāĻ•ā§āĻŸā§‹āϜ
  • āĻĄāĻžāχāĻ¸ā§āϝāĻžāĻ•āĻžāϰāĻžāχāĻĄ : āϏ⧁āĻ•ā§āϰ⧋āϜ (āϚāĻŋāύāĻŋ), āĻŽāĻ˛ā§āĻŸā§‹āϜ
  • āĻŸā§āϰāĻžāχāĻ¸ā§āϝāĻžāĻ•āĻžāϰāĻžāχāĻĄ : āĻ°â€ā§āϝāĻžāĻĢāĻŋāύ⧋āϜ
  • āĻĒāϞāĻŋāĻ¸ā§āϝāĻžāĻ•āĻžāϰāĻžāχāĻĄ : āĻ¸ā§āϟāĻžāĻ°ā§āϚ, āϏ⧇āϞ⧁āϞ⧋āϜ, āĻ—ā§āϞāĻžāχāϕ⧋āĻœā§‡āύ

⧍. āĻ—ā§āϞāĻžāχāϕ⧋āĻœā§‡āύāϕ⧇ āĻĒā§āϰāĻžāĻŖāĻŋāϜ āĻ¸ā§āϟāĻžāĻ°ā§āϚ āĻŦāϞāĻž āĻšāϝāĻŧāĨ¤ āĻ¸ā§āϟāĻžāĻ°ā§āϚ āĻšāϞ āωāĻĻā§āĻ­āĻŋāĻĻ⧇āϰ āϜāĻŽāĻžāύ⧋ āĻ–āĻžāĻĻā§āϝ āϝāĻž āĻ—ā§āϞ⧁āϕ⧋āĻœā§‡āϰ āĻĒāϞāĻŋāĻŽāĻžāϰāĨ¤ āĻ—ā§āϞāĻžāχāϕ⧋āĻœā§‡āύ āϤ⧇āĻŽāύāĻŋ āĻ—ā§āϞ⧁āϕ⧋āĻœā§‡āϰ āĻĒāϞāĻŋāĻ•āĻžāϰ āϝāĻž āĻĒā§āϰāĻžāĻŖāĻŋāϰ āĻĻ⧇āĻšā§‡ āϏāĻžā§āϚāĻŋāϤ āĻ–āĻžāĻĻā§āϝ āϰ⧂āĻĒ⧇ āϜāĻŽāĻž āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤

ā§Š. āϏ⧇āϞ⧁āϞ⧋āĻœā§‡ ß-D āĻ—ā§āϞ⧁āϕ⧋āϜ āĻĒāϞāĻŋāĻŽāĻžāϰ, āĻāϰ āĻĢāϞ⧇ āĻļāĻ•ā§āϤāĨ¤ āĻ¸ā§āϟāĻžāĻ°ā§āϚ āĻšāϞ Îą-D āĻ—ā§āϞ⧁āϕ⧋āϜ āĻĒāϞāĻŋāĻŽāĻžāϰāĨ¤

ā§Ē. āϏāĻŽā§āĻĒ⧃āĻ•ā§āϤ āĻĢā§āϝāĻžāϟāĻŋ āĻāϏāĻŋāĻĄā§‡āϰ āϞāĻŋāĻĒāĻŋāĻĄ āĻ•āĻ āĻŋāύ āĻ…āĻŦāĻ¸ā§āĻĨāĻžāϝāĻŧ āĻĨāĻžāϕ⧇, āĻāĻĻ⧇āϰ āϚāĻ°ā§āĻŦāĻŋ āĻŦāϞ⧇āĨ¤ āϏāĻŽā§āĻĒ⧃āĻ•ā§āϤ āĻšāĻ“āϝāĻŧāĻžāϝāĻŧ āĻŦāϞāϤ⧇ āĻŦā§‹āĻāĻžāϝāĻŧ āĻ…āϪ⧁āϤ⧇ āϕ⧋āύ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύ āĻĻā§āĻŦāĻŋāĻŦāĻ¨ā§āϧāύ⧀, āĻ¤ā§āϰāĻŋāĻŦāĻ¨ā§āϧāύ⧀ āύāĻž āĻĨāĻžāĻ•āĻžāĨ¤

ā§Ģ. āĻ…āϏāĻŽā§āĻĒ⧃āĻ•ā§āϤ āĻĢā§āϝāĻžāϟāĻŋ āĻāϏāĻŋāĻĄā§‡āϰ āϞāĻŋāĻĒāĻŋāĻĄ āϤāϰāϞ āĻ…āĻŦāĻ¸ā§āĻĨāĻžāϝāĻŧ āĻĨāĻžāϕ⧇, āĻāĻĻ⧇āϰ āϤ⧇āϞ āĻŦāϞ⧇āĨ¤ āĻāĻĻ⧇āϰ āĻ…āĻŖā§‚āϤ⧇ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύ-āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύ āĻĻā§āĻŦāĻŋāĻŦāĻ¨ā§āϧāύ⧀, āĻ¤ā§āϰāĻŋāĻŦāĻ¨ā§āϧāύ⧀ āĻŦāĻŋāĻĻā§āϝāĻŽāĻžāύāĨ¤

ā§Ŧ. āĻ¸ā§āĻŸā§‡āϰāϝāĻŧ⧇āĻĄ, āĻŽā§‹āĻŽ, āϰāĻžāĻŦāĻžāϰ āχāĻ¤ā§āϝāĻžāĻĻāĻŋ āĻāĻ• āĻĒā§āϰāĻ•āĻžāϰ āϞāĻŋāĻĒāĻŋāĻĄāĨ¤

ā§­. āĻļāĻ°ā§āĻ•āϰāĻž āĻ…āĻĒ⧇āĻ•ā§āώāĻž āϞāĻŋāĻĒāĻŋāĻĄā§‡ āĻŦ⧇āĻļāĻŋ āĻĒāϰāĻŋāĻŽāĻžāĻŖ āĻļāĻ•ā§āϤāĻŋ āϏāĻžā§āϚāĻŋāϤ āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤

ā§Ž. āĻĒā§āϰ⧋āϟāĻŋāύ āĻ—āĻ āύāĻ•āĻžāϰ⧀ āĻ…ā§āϝāĻžāĻŽāĻŋāύ⧋ āĻāϏāĻŋāĻĄā§‡āϰ āϏāĻ‚āĻ–ā§āϝāĻž āĻšāϞ ⧍ā§ĻāĨ¤

⧝. āĻĒā§āϰ⧋āϟāĻŋāύ⧇ āĻāĻ•āϟāĻž āĻ…ā§āϝāĻžāĻŽāĻŋāύ⧋ āĻāϏāĻŋāĻĄā§‡āϰ āϏāĻžāĻĨ⧇ āφāϰ⧇āĻ•āϟāĻž āĻ…ā§āϝāĻžāĻŽāĻŋāύ⧋ āĻāϏāĻŋāĻĄ āĻĒ⧇āĻĒāϟāĻžāχāĻĄ āĻŦāĻ¨ā§āϧāύ⧀ āĻĻā§āĻŦāĻžāϰāĻž āϝ⧁āĻ•ā§āϤāĨ¤

ā§§ā§Ļ. āύāĻžāχāĻŸā§āϰ⧋āĻœā§‡āύ āĻ•ā§āώāĻžāϰāĻ•, āĻĒ⧇āĻ¨ā§āĻŸā§‹āϜ āϏ⧁āĻ—āĻžāϰ (āϰāĻžāχāĻŦā§‹āϜ āĻŦāĻž āĻĄāĻŋāĻ…āĻ•ā§āϏāĻŋāϰāĻžāχāĻŦā§‹āϜ) āĻ“ āĻĢāϏāĻĢā§‹āϰāĻŋāĻ• āĻāϏāĻŋāĻĄ āύāĻŋāϝāĻŧ⧇ āύāĻŋāωāĻ•ā§āϞāĻŋāĻ• āĻāϏāĻŋāĻĄ āĻ—āĻ āĻŋāϤāĨ¤

ā§§ā§§. āύāĻžāχāĻŸā§āϰ⧋āĻœā§‡āύ āĻ—āĻ āĻŋāϤ āĻŦ⧇āϏ āĻĻā§â€™āĻĒā§āϰāĻ•āĻžāϰ, āĻĒāĻŋāωāϰāĻŋāύ āĻ“ āĻĒāĻžāχāϰāĻŋāĻŽāĻŋāĻĄāĻŋāύ:

āĻĒāĻŋāωāϰāĻŋāύ = āĻ…ā§āϝāĻžāĻĄā§‡āύāĻŋāύ, āϗ⧁āϝāĻŧāĻžāύāĻŋāύ

āĻĒāĻžāχāϰāĻŋāĻŽāĻŋāĻĄāĻŋāύ = āĻĨāĻžāχāĻŽāĻŋāύ, āϏāĻžāχāĻŸā§‹āϏāĻŋāύ, āχāωāϰāĻžāϏāĻŋāϞ

(A=T/U, G=C) (“āĻāϟāĻŋ āϜāĻŋāϏāĻŋ” āĻāχ āϟāĻžāĻ°ā§āĻŽ āĻŽāύ⧇ āϰāĻžāĻ–āĻž āϝ⧇āϤ⧇ āĻĒāĻžāϰ⧇)

⧧⧍. ⧧⧝ā§Ģā§Š āϏāĻžāϞ⧇ āĻ“āϝāĻŧāĻžāϟāϏāύ āĻ“ āĻ•ā§āϰ⧀āĻ• DNA-āĻāϰ āĻĄāĻžāĻŦāϞ āĻšā§‡āϞāĻŋāĻ•ā§āϏ āĻŽāĻĄā§‡āϞ āĻĒā§āϰāĻĻāĻžāύ āĻ•āϰ⧇āύāĨ¤

ā§§ā§Š. āĻĒāĻŋāωāϰāĻŋāύ āĻ“ āĻĒāĻžāχāϰāĻŋāĻŽāĻŋāĻĄāĻŋāύ āĻŦ⧇āϏ⧇āϰ āĻŽāĻ§ā§āϝ⧇ āĻšāĻžāχāĻĄā§āϰ⧋āĻœā§‡āύ āĻŦāĻ¨ā§āĻĄ āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤ āĻ…ā§āϝāĻžāĻĄā§‡āύāĻŋāύ-āĻĨāĻžāχāĻŽāĻŋāύ-āĻāϰ āĻ•ā§āώ⧇āĻ¤ā§āϰ⧇ āĻĻ⧁āχāϟāĻŋ āĻšāĻžāχāĻĄā§āϰ⧋āĻœā§‡āύ āĻŦāĻ¨ā§āĻĄ āĻāĻŦāĻ‚ āϗ⧁āϝāĻŧāĻžāύāĻŋāύ=āϏāĻžāχāĻŸā§‹āϏāĻŋāύ-āĻāϰ āĻ•ā§āώ⧇āĻ¤ā§āϰ⧇ āϤāĻŋāύāϟāĻŋ āĻšāĻžāχāĻĄā§āϰ⧋āĻœā§‡āύ āĻŦāĻ¨ā§āĻĄ āĻĻāĻŋāϝāĻŧ⧇ āϏāĻ‚āϝ⧁āĻ•ā§āϤ āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤

ā§§ā§Ē. āϏ⧁āĻ¤ā§āϰāĻ• āĻĻā§â€™āϟāĻŋ āĻĒāϰāĻ¸ā§āĻĒāϰ āϏāĻŽāĻžāĻ¨ā§āϤāϰāĻžāϞ āĻ•āĻŋāĻ¨ā§āϤ⧁ āĻŦāĻŋāĻĒāϰ⧀āϤāĻŽā§āĻ–ā§€āĨ¤ āĻāĻ•āϟāĻŋ ā§Ģ’ -> ā§Šâ€™ āĻāĻŦāĻ‚ āφāϰ⧇āĻ•āϟāĻŋ ā§Šâ€™ -> ā§Ģ’ āĻ•āĻžāĻ°ā§āĻŦāύāĻŽā§āĻ–ā§€ āĻ…āĻŦāĻ¸ā§āĻĨāĻžāύ⧇ āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤

ā§§ā§Ģ. DNA āϤ⧇ āϝ⧇āĻ–āĻžāύ⧇ āĻĨāĻžāχāĻŽāĻŋāύ āĻĨāĻžāϕ⧇, RNA āϤ⧇ āϏ⧇āχ āϜāĻžāϝāĻŧāĻ—āĻžāϝāĻŧ āχāωāϰāĻžāϏāĻŋāϞ āĻĨāĻžāϕ⧇āĨ¤

ā§§ā§Ŧ. DNA āĻĻā§āĻŦāĻŋāϏ⧂āĻ¤ā§āϰāĻ•, RNA āĻāĻ•āϏ⧂āĻ¤ā§āϰāĻ•āĨ¤

ā§§ā§­. āĻĒāĻžāρāϚ āĻĒā§āϰāĻ•āĻžāϰ⧇āϰ RNA āĻĒāĻžāĻ“āϝāĻŧāĻž āϝāĻžāϝāĻŧ, mRNA, tRNA, rRNA, gRNA, minor RNAāĨ¤ āϏāĻŦāĻšā§‡āϝāĻŧ⧇ āϗ⧁āϰ⧁āĻ¤ā§āĻŦāĻĒā§‚āĻ°ā§āĻŖ āĻĒā§āϰāĻĨāĻŽ āϤāĻŋāύāϟāĻŋāĨ¤ m, t, r āĨ¤

ā§§ā§Ž. RNA āĻāĻ•āϏ⧂āĻ¤ā§āϰāĻ• āĻŦāϞ⧇ āĻāĻĻ⧇āϰ āϕ⧋āύ āĻ…āύ⧁āϞāĻŋāĻĒāύ āĻšāϝāĻŧ āύāĻžāĨ¤

⧧⧝. āĻāύāϜāĻžāχāĻŽā§‡āϰ āĻ•āĻžāĻ°ā§āϝāĻ•āĻžāϰāĻŋāϤāĻž 35°-40°C āϤāĻžāĻĒāĻŽāĻžāĻ¤ā§āϰāĻžāϝāĻŧ āϏāĻŦāĻšā§‡āϝāĻŧ⧇ āĻŦ⧇āĻļāĻŋāĨ¤

⧍ā§Ļ. āĻāύāϜāĻžāχāĻŽā§‡āϰ āϜāĻ¨ā§āϝ āĻ•āĻžāĻ°ā§āϝāĻ•āϰ⧀ pH āĻāϰ āĻŽāĻžāύ 5.0 – 9.0